1.研究背景
尼古丁是煙草葉中含有的一種天然生物堿。煙草和香煙煙霧在涉及心血管、內(nèi)分泌、呼吸和生殖系統(tǒng)等多種器官和系統(tǒng)的多種病理學(xué)發(fā)展中起著致病作用。據(jù)世界衛(wèi)生組織2017年報(bào)告,全球尼古丁濫用程度估計(jì)為11億吸煙者,每年有800萬(wàn)人死亡。此外,長(zhǎng)期尼古丁濫用還會(huì)誘發(fā)成癮,調(diào)節(jié)大腦中的主要神經(jīng)遞質(zhì)類別。因此,吸煙會(huì)對(duì)健康造成潛移默化的影響。
有研究曾發(fā)現(xiàn)尼古丁會(huì)引起厭惡和焦慮。吸煙與焦慮之間的關(guān)系復(fù)雜,理解尼古丁依賴背后的行為學(xué),對(duì)于開(kāi)發(fā)和完善有效的方法來(lái)阻斷煙癮可能很重要。本研究旨在通過(guò)定量和多元T型分析(TPA)評(píng)估不同劑量的長(zhǎng)期尼古丁攝入對(duì)大鼠焦慮行為影響。
2.研究方法
本研究中使用白色不透明有機(jī)玻璃制成的一個(gè)方形(50×50 cm)曠場(chǎng)區(qū)域,包含四個(gè)直徑為4 cm的等距孔。使用40只雄性大鼠,被隨機(jī)分為四組,每組10只,大鼠被放置在試驗(yàn)區(qū)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。以0.1、0.5和1mg/kg/天的劑量給藥尼古丁,每天三次,連續(xù)14天。生理鹽水1 ml/kg,每天3次作為對(duì)照。
基于先前研究中使用的行為類別,由訓(xùn)練有素的專業(yè)人員使用諾達(dá)思的行為觀察記錄分析系統(tǒng)(The Observer XT)對(duì)測(cè)試的視頻文件進(jìn)行標(biāo)注和分類。大鼠行為模式圖(圖1)包括以下:行走(Wa)、固定嗅探(IS)、攀爬(Cl)、后腿直立(Re)、邊緣嗅探(ES)、頭部探嗅(HD)、前爪舔(FPL)、后爪舔(HPL)、面部理毛(FG)、身體理毛(BG)、靜止(Imm)。
圖1
諾達(dá)思行為觀察記錄分析系統(tǒng)(The Observer XT)是一款功能強(qiáng)大的軟件,從制定行為編碼方案,收集和篩選數(shù)據(jù),到對(duì)復(fù)雜數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,支持研究項(xiàng)目的整個(gè)工作流程。系統(tǒng)可以編碼和觀察各種行為,也可以整合其他數(shù)據(jù)并進(jìn)行分析。清晰的數(shù)據(jù)可視化和強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析能力可以為研究項(xiàng)目的整個(gè)工作流程提供支持和幫助。
3.研究結(jié)果
3.1.長(zhǎng)期尼古丁攝入會(huì)誘發(fā)明顯的焦慮相關(guān)行為
行為的平均持續(xù)時(shí)間(秒)如圖2所示,行走(Wa)、攀爬(Cl)、靜止(Imm),固定嗅探(IS)和后腿直立(Re)有顯著變化。與生理鹽水組相比,行走(Wa)和固定嗅探(IS)在0.3 mg/kg/天,攀爬(Cl)和后腿直立(Re)在所有劑量下均顯著降低。0.3mg/kg/天時(shí),靜止(Imm)顯著增加。
圖2
行為的平均發(fā)生率如圖3所示。行走(Wa)、攀爬(Cl)、固定嗅探(IS)、邊緣嗅探(ES)、頭部探嗅(HD)和后腿直立(Re)的變化顯著。測(cè)試顯示,與鹽水組相比,行走(Wa)、攀爬(Cl)和頭部探嗅(HD)在所有劑量下,固定嗅探(IS)和邊緣嗅探(ES)在0.3mg/kg/天的劑量下均顯著降低(p<0.05)。
圖3
從數(shù)據(jù)結(jié)果可以看出,在不同劑量尼古丁攝入的大鼠中,行走(Wa)、固定嗅探(IS)、攀爬(Cl)、后腿直立(Re)活性明顯降低,靜止(Imm)顯著增加,其持續(xù)時(shí)間和發(fā)生頻率也不同,這些結(jié)果表明焦慮水平增加。
3.2. 尼古丁會(huì)引起不同類型焦慮
圖4
圖4A所示,鹽水組T型的平均長(zhǎng)度±SEM為2,尼古丁0.3、1.5和3 mg/kg/天分別為3.47±0.16、2.23±0.12、2.66±0.21;與鹽水相比,尼古丁0.3 mg/kg/天顯著增加(p<0.05)。如圖4B所示,生理鹽水組T型的平均出現(xiàn)率±SEM為222±107,尼古丁0.3、1.5和3 mg/kg/天分別為45.6±10.6、113±33.8、113±31.1;與生理鹽水相比,尼古丁0.3 mg/kg/天的減少量顯著(p<0.05)。
圖5
圖5顯示,在所有尼古丁組中,頭探和邊緣嗅聞的T型顯著增加。
(1)長(zhǎng)期尼古丁會(huì)引起不同類型的焦慮
在相同的實(shí)驗(yàn)方法中,短期攝入尼古丁的大鼠在洞穴探索(ES和HD)和垂直探索(Cl和Re)的成分方面出現(xiàn)了顯著變化。T型分析的結(jié)果揭示了短期和長(zhǎng)期尼古丁攝入之間非常不同的情況。可以證明,在水平探索行為(即Wa和IS)方面存在明顯差異,在梳理活動(dòng)(即FPL、HPL、FG、BG)方面存在明確差異。事實(shí)上,在短期尼古丁攝入情況下,水平活動(dòng)不會(huì)發(fā)生變化,梳理活動(dòng)也會(huì)發(fā)生明顯變化,但在目前長(zhǎng)期尼古丁的研究結(jié)果中,水平探索受到了嚴(yán)重影響,而梳理似乎根本沒(méi)有改變。由于探索和梳理行為的變化與焦慮水平的改變密切相關(guān),因此,我們的研究結(jié)果表明,在短期和長(zhǎng)期尼古丁攝入后,會(huì)出現(xiàn)一種與焦慮相關(guān)的性質(zhì)不同的行為。
(2)長(zhǎng)期尼古丁作用下行為的時(shí)間效應(yīng)影響
在所有尼古丁接觸組中,不同T型的數(shù)量都有所增加。我們沒(méi)有觀察到劑量依賴效應(yīng)。有趣的是,在低尼古丁劑量(0.3毫克/千克/天)下達(dá)到了顯著的效果;平均發(fā)生率,在所有劑量下都明顯減少。尼古丁的長(zhǎng)期攝入導(dǎo)致的變化是更顯著的行為變異性(即不同T型數(shù)量的增加),更多的復(fù)雜性(即T型長(zhǎng)度的增加)以及更少?gòu)?fù)發(fā)(即降低T型的平均發(fā)生率)。簡(jiǎn)言之,長(zhǎng)期的尼古丁作用下的大鼠會(huì)產(chǎn)生更多不同的T型,更復(fù)雜,但重復(fù)這些T型的次數(shù)更少。
事實(shí)上,在所有尼古丁治療組中,頭部探嗅和邊緣嗅探的行為成分?jǐn)?shù)量顯著減少,但這兩種成分在所有T型中的存在顯著增加。這些數(shù)據(jù)表明,在長(zhǎng)期尼古丁被試中,兩種專注探索活動(dòng),即頭部探嗅和邊緣嗅探,在構(gòu)建焦慮相關(guān)行為中起著關(guān)鍵作用。T型的存在越顯著,其組成變化越大,并且含有更多的頭部探嗅和邊緣嗅探,這表明焦慮相關(guān)行為顯著。這種行為變得更為復(fù)雜,并趨向于探索與被試相關(guān)的環(huán)境刺激。因此,目前的數(shù)據(jù)支持長(zhǎng)期尼古丁會(huì)在行為發(fā)生的背景下引發(fā)更明確、更結(jié)構(gòu)化、更有組織的焦慮相關(guān)行為。
總結(jié)
目前的研究表明,長(zhǎng)期尼古丁會(huì)誘發(fā)明顯的焦慮相關(guān)行為。一方面,這種情況是非常明顯的,另一方面,它與在短期尼古丁攝入動(dòng)物中觀察到的情況不同,本研究結(jié)果強(qiáng)調(diào)了一種更具體、更集中、更結(jié)構(gòu)化的焦慮相關(guān)行為。更好地理解尼古丁和焦慮之間的聯(lián)系,或許可以找到戒煙的新療法。
參考文獻(xiàn)
Casarrubea M, Pierucci M, Aiello S, et al. Effects of chronic nicotine on the temporal structure of anxiety-related behavior in rats tested in hole-board. Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry, 2020, 96: 109731.
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